Considerarea etichetei camerei ca fiind decizia de izolare este cea mai frecventă și cea mai defensivă greșeală în planificarea laboratoarelor BSL-2. Instalația poartă o denumire BSL-2, echipa presupune că controalele standard se aplică în mod uniform, iar specificațiile dulapului sunt redactate în funcție de sarcina medie, mai degrabă decât de cea cu cel mai mare risc. Lacuna devine vizibilă doar în timpul unei revizuiri a incidentului sau al unui audit de conformitate - moment în care limbajul PSO care părea suficient de larg se dovedește a fi mai degrabă o responsabilitate decât o măsură de protecție. Înțelegerea manipulărilor care necesită, de fapt, protecție în dulap închis și motivul pentru care această determinare urmează fluxul de lucru, mai degrabă decât clasificarea camerei, este ceea ce separă un plan de izolare defensabil de unul care pare complet pe hârtie.

Ce manipulări BSL-2 necesită cu adevărat protecție în cabină închisă

Cerința de izolare la BSL-2 nu este uniformă pentru toate procedurile efectuate în laborator. Declanșatorul specific care schimbă manipularea de la banc deschis la cabinet închis este dacă o anumită procedură are potențialul de a crea stropi, pulverizări sau aerosoli. Această distincție este procedurală, nu bazată pe agent, și se aplică chiar și atunci când agentul implicat nu este considerat de obicei transmisibil prin aerosoli.

Acest lucru este important deoarece multe laboratoare BSL-2 efectuează o combinație de manipulări - dintre care unele sunt cu adevărat cu risc scăzut la banc și altele nu. Pipetările în tuburi deschise, vortexarea probelor, decapsularea recipientelor și efectuarea transferurilor între recipiente au toate un potențial de generare de aerosoli care nu este eliminat de controalele fizice din încăpere. Niciunul dintre acești pași nu este în mod inerent neobișnuit pentru un flux de lucru BSL-2, tocmai de aceea sunt ușor de subestimat. Potențialul de producere a aerosolilor nu este dramatic; este de rutină. Acesta este riscul.

Implicația practică este că un laborator nu își poate determina necesarul de dulapuri doar prin revizuirea listei de agenți. Acesta trebuie să își revizuiască lista de proceduri, pas cu pas, și să identifice manipulările specifice care depășesc pragul de generare de aerosoli. În cazul în care inventarul PSO nu a fost revizuit la acest nivel de rezoluție, specificațiile dulapului care îl urmează sunt probabil subdefinite - acoperind mai degrabă cazul tipic decât pe cel determinat de proceduri.

Modul în care etapele generatoare de aerosoli modifică cerințele cabinetului

Odată ce o procedură este clasificată ca generatoare de aerosoli, utilizarea dulapului trece de la recomandabil la necesar din punct de vedere operațional pentru protecția personalului. Aceasta nu este o decizie care variază în funcție de cultura laboratorului sau de spațiul de lucru disponibil - este o consecință directă a ceea ce înseamnă generarea de aerosoli pentru riscul de expunere.

Distincția are o consecință practică pe care echipele o subestimează adesea: clasificarea generatoare de aerosoli este atribuită etapei, nu agentului. Aceasta înseamnă că o etapă de vortexare cu un agent BSL-2 cu risc relativ scăzut are aceeași cerință procedurală de izolare ca și o manipulare mai sensibilă cu un organism care prezintă un risc mai ridicat. Etapa este cea care generează calea de expunere, iar etapa este cea pe care cabinetul este menit să o intercepteze.

Acest lucru înseamnă, de asemenea, că laboratoarele care efectuează etape generatoare de aerosoli doar ocazional - nu ca flux de lucru principal, ci ca parte a pregătirii sau a procesării - nu pot trata aceste etape ca fiind cazuri excepționale care nu se încadrează în planul cabinetului. O manipulare care are loc o dată pe ciclu și care generează un risc de expunere la aerosoli de fiecare dată când are loc este un risc de rutină, nu unul excepțional. Specificațiile dulapului trebuie să reflecte acest lucru. Pentru laboratoarele care trebuie să decidă ce clasă de incintă se aplică fluxului lor de lucru specific, documentul Dulapuri de biosecuritate clasa II: Ghid cuprinzător oferă o referință utilă pentru înțelegerea diferențelor funcționale dintre tipurile de incinte.

De ce selectarea dulapului ar trebui să urmeze mai degrabă cartografierea fluxului de lucru decât doar eticheta camerei

Desemnarea unei camere BSL-2 vă spune că instalația îndeplinește un set definit de cerințe fizice și procedurale de bază. Aceasta nu vă spune ce manipulări specifice din camera respectivă necesită o manipulare închisă și, pentru anumite fluxuri de lucru, nu ia în considerare pe deplin riscul agentului încorporat în probele în sine.

O lacună de planificare care apare în mod regulat este manipularea materialelor de origine umană în cazul cărora prezența unui agent infecțios poate fi necunoscută. Necesitatea de izolare este determinată de tipul probei, nu de identificarea confirmată a agentului. În cazul în care un flux de lucru implică prelucrarea unor materiale care ar putea purta în mod plauzibil un agent infecțios necaracterizat, eticheta camerei nu este o bază suficientă pentru a decide că lucrul în bancul deschis este acceptabil. Fluxul de lucru - ce se face cu acele materiale, la ce volum și folosind ce etape specifice - trebuie să determine acest lucru.

Riscul de eșec în acest caz nu este ipotetic. Laboratoarele care selectează dulapul pe baza denumirii BSL-2 a încăperii, fără a stabili care etape din cadrul fluxului de lucru necesită de fapt manipularea în incintă, scriu adesea un limbaj SOP care este larg, dar imprecis: “procedurile ar trebui efectuate într-o cabină de biosecuritate, după caz”. Acest limbaj pare adecvat în momentul scrierii. Este dificil de apărat dacă o etapă specifică generatoare de aerosoli - una care ar fi trebuit să fie atribuită în mod explicit dulapului - a fost efectuată pe bancă. Cartografierea fluxului de lucru înainte de specificarea cabinetului este ceea ce închide această lacună.

Ce ipoteze privind deșeurile SOP și curățarea ar trebui să analizeze cumpărătorii

Discuțiile privind selectarea dulapului includ rareori o revizuire structurată a cerințelor de decontaminare a deșeurilor și de curățare a suprafețelor, însă ambele au implicații directe asupra modului în care dulapul trebuie configurat și integrat în fluxul de lucru. Descoperirea, după achiziție, a faptului că procesul de manipulare a deșeurilor necesită amplasarea în interiorul dulapului sau că protocolul de curățare este incompatibil cu materialele din interiorul dulapului obligă la găsirea unor soluții operaționale care adaugă fricțiune fără a adăuga protecție.

Cele două verificări de bază - frecvența decontaminării suprafețelor de lucru și metoda de decontaminare a deșeurilor înainte de eliminare - nu sunt cerințe noi, dar sunt tratate frecvent ca detalii SOP, mai degrabă decât ca elemente de achiziție.

Consecința omiterii acestor verificări în etapa de achiziție nu este, de obicei, un eșec de siguranță, ci unul operațional. Un dulap care a fost selectat fără a ține cont de fluxul de manipulare a deșeurilor poate necesita ca personalul să mute materialele în afara incintei înainte de decontaminare, ceea ce reintroduce riscul de expunere pe care dulapul trebuia să îl prevină. Un protocol de curățare care necesită anumite materiale de suprafață sau configurații de scurgere trebuie să corespundă cu ceea ce oferă de fapt dulapul. Aceste aspecte sunt ușor de aliniat în stadiul de specificație și dificil de remediat după instalare.

Atunci când acoperirea de clasă II este suficientă pentru activitatea de rutină BSL-2

Pentru marea majoritate a fluxurilor de lucru de rutină BSL-2 - lucrări care nu implică substanțe chimice volatile, care nu necesită o clasificare superioară pe baza riscului de agent și care sunt efectuate la volume standard de probe - o cabină de clasă II, tip A2 oferă un nivel de protecție practic și bine caracterizat. Condiția de suficiență nu este universală, dar este fiabilă atunci când parametrii fluxului de lucru se încadrează în ceea ce această clasă de cabinete este proiectată să abordeze.

Designul clasei II A2 oferă trei funcții de protecție distincte, fiecare vizând o cale de expunere diferită.

Cifra de 100 fpm (0,51 m/s) a fluxului de aer interior care definește protecția personalului în acest context este un reper de proiectare și performanță, nu o valoare care poate fi presupusă la instalare. Aceasta trebuie validată în timpul certificării dulapului, deoarece viteza de intrare este influențată de condițiile din încăpere, de amplasarea în raport cu gurile de ventilație de alimentare și retur HVAC, de modelele de trafic pietonal și de poziția echipamentelor la și în interiorul deschiderii dulapului. Un dulap care îndeplinește specificațiile de proiectare în mod izolat poate să nu mențină acel profil al fluxului de aer odată plasat în mediul său real de funcționare. Acesta este motivul pentru care certificarea anuală este importantă: confirmă performanța în condiții reale, nu în condiții de fabrică.

Pentru laboratoarele care evaluează anumite modele de dulapuri și caracteristicile lor privind fluxul de aer, revizuirea specificațiilor verificate prin intermediul unui cabinet de securitate biologică poate ajuta echipele să înțeleagă reperele de proiectare relevante pentru fluxul lor de lucru înainte de a lua decizii de achiziție.

Care prag de protecție ar trebui să declanșeze revizuirea caietului de sarcini

Selectarea standard a clasei II A2 este punctul de plecare corect pentru majoritatea fluxurilor de lucru BSL-2. Cu toate acestea, există praguri operaționale specifice în care această selecție devine insuficientă și în care specificarea în funcție de modelul standard fără revizuire creează o lacună care va trebui abordată - fie printr-o modernizare, fie prin restricții operaționale care limitează ceea ce laboratorul poate face de fapt.

Două praguri justifică o revizuire formală a specificațiilor, mai degrabă decât o selecție implicită.

Pragul chimic volatil este cel mai frecvent întâlnit la mijlocul proiectului. Un flux de lucru care începe ca o procedură pur biologică poate include fixatori chimici, solvenți sau alți reactivi volatili pe măsură ce protocolul se dezvoltă. Un dulap de clasa II A2 fără o conexiune la sistemul de evacuare al clădirii nu este proiectat pentru eliminarea vaporilor - iar adăugarea acestei conexiuni după instalare este simplă din punct de vedere structural în concept, dar costisitoare din punct de vedere logistic și financiar în practică. În cazul în care există o probabilitate rezonabilă ca fluxul de lucru să includă cantități mici de substanțe chimice volatile, cerința de conectare la sistemul de evacuare ar trebui definită în faza de proiectare, nu tratată ca o modificare ulterioară.

Certificarea anuală este un alt tip de prag - nu este un declanșator al fluxului de lucru, ci are consecințe directe asupra conformității și validării care trebuie integrate în planul operațional înainte de finalizarea achiziției. Certificarea nu este autoefectivă. Aceasta necesită programare, acces, personal calificat sau servicii contractate și documente care să susțină poziția laboratorului în ceea ce privește conformitatea. Instalațiile care nu au confirmat dacă programul lor de întreținere și infrastructura de evacuare a gazelor de eșapament pot susține cerințele dulapului certificat nu și-au completat specificația - au completat doar o parte a acesteia. Orientările din Asigurarea siguranței în caz de risc biologic: Cele mai bune practici pentru utilizarea cabinetului de securitate biologică acoperă practicile operaționale și de întreținere care sunt direct relevante pentru menținerea în timp a performanței cabinetului certificat.

Cea mai clară confirmare înainte de achiziție pe care o poate face o echipă de laborator BSL-2 nu este clasa de dulap de care are nevoie, ci pașii procedurali specifici din fluxul lor de lucru care generează riscul de aerosoli, stropi sau pulverizări și dacă acești pași au fost atribuiți în mod explicit manipulării în incintă în SOP-ul scris. Acest exercițiu de cartografiere definește necesarul de dulap cu mult mai multă precizie decât o face desemnarea camerei și scoate la suprafață variabilele din aval - expunerea la substanțe chimice volatile, etapizarea decontaminării deșeurilor, compatibilitatea protocolului de curățare și programarea certificării - înainte ca acestea să devină probleme de modernizare.

În cazul în care cartografierea fluxului de lucru nu a fost finalizată, selecția dulapurilor care urmează acesteia se bazează pe o intrare incompletă. Specificațiile ar trebui să urmeze inventarul procedurii, tipul și configurația dulapului fiind adaptate la etapa de rutină cu cel mai mare risc, mai degrabă decât la cea mediană. Orice prag care se situează în afara pachetului de proiectare standard al clasei II A2 - în special manipularea substanțelor chimice volatile - trebuie să fie confirmat în raport cu capacitățile infrastructurii înainte de luarea deciziei de achiziție, nu după începerea punerii în funcțiune.

Întrebări frecvente

Î: Ce se întâmplă dacă laboratorul nostru BSL-2 manipulează doar probe de origine umană fără agent infecțios confirmat - mai avem nevoie de un dulap?
R: Da, absența unui agent confirmat nu elimină cerința privind dulapul. Necesitatea de izolare este determinată de posibilitatea ca un agent infecțios să fie prezent în eșantion, nu de o identificare confirmată. Dacă fluxul dvs. de lucru implică prelucrarea materialelor de origine umană în cazul cărora statutul agentului este necunoscut, această incertitudine reprezintă în sine baza riscului - iar manipulările cu potențial de generare de aerosoli în acest context necesită manipularea în incintă, indiferent dacă un agent a fost sau nu caracterizat.

Î: După ce cartografierea fluxului de lucru este completă, ce trebuie să se întâmple înainte de finalizarea achiziției?
R: Fluxul de lucru cartografiat trebuie comparat cu infrastructura fizică a laboratorului înainte de selectarea unui dulap. În special, echipele trebuie să confirme dacă oricare dintre etapele identificate implică substanțe chimice volatile - deoarece acest lucru determină dacă este necesară o conexiune de evacuare a aerului din baldachin - și dacă locația planificată pentru instalare poate susține viteza fluxului de aer interior de 100 fpm în condiții reale de cameră, ținând cont de amplasarea sistemului HVAC, de traficul pietonal și de echipamentele adiacente. Aceste verificări ale infrastructurii aparțin etapei de specificare, nu celei de punere în funcțiune.

Î: În ce moment un flux de lucru BSL-2 depășește în întregime acoperirea Clasa II A2?
R: Pachetul de proiectare al clasei II A2 se încheie atunci când fluxul de lucru implică manipularea substanțelor chimice volatile sau când riscul agentului justifică o clasificare de izolare superioară. Pentru substanțele chimice volatile, chiar și cantitățile mici introduc o expunere la vapori pe care un dulap fără o conexiune de evacuare nu o poate gestiona în siguranță - proiectarea dulapului nu asigură eliminarea vaporilor fără această legătură de infrastructură. În cazul în care oricare dintre aceste condiții se aplică chiar și unui subset de etape de rutină, specificațiile trebuie să reflecte acest prag, în loc să utilizeze în mod implicit modelul standard.

Î: Este un cabinet de biosecuritate sau un izolator cea mai bună alegere de izolare pentru procedurile BSL-2 de înaltă sensibilitate?
R: Depinde dacă prioritatea este protecția personalului în timpul manipulării deschise sau separarea cvasi-absolută între operator și material. Un dulap de clasa II asigură o protecție solidă a personalului, produselor și mediului pentru marea majoritate a fluxurilor de lucru BSL-2 care implică etape generatoare de aerosoli. Tehnologia izolatorului oferă o barieră fizică închisă care elimină complet limita de aer comun, ceea ce devine relevant atunci când manipularea necesită o mai mare asigurare a separării - cum ar fi testarea sterilității - mai degrabă decât simpla gestionare a riscului de aerosoli într-o incintă cu front deschis. Profilul de risc de contaminare al fluxului de lucru, nu doar eticheta BSL-2, determină arhitectura adecvată.

Î: Cum decideți dacă o etapă ocazională generatoare de aerosoli - una care are loc o singură dată pe ciclu - justifică alocarea unui cabinet dedicat procedurii respective?
R: Frecvența nu reduce riscul de expunere care apare de fiecare dată când este efectuată etapa. O manipulare care generează aerosoli o dată pe ciclu creează o cale de expunere repetabilă la fiecare ciclu - este un risc de rutină prin definiție operațională, chiar dacă ocupă o fracțiune mică din timpul total al procedurii. Decizia de a atribui manipularea închisă acestei etape ar trebui să se bazeze pe faptul că aceasta depășește pragul de generare de aerosoli, nu pe frecvența cu care apare în protocol. În cazul în care această etapă depășește pragul respectiv, ea trebuie să se desfășoare în cabinet, indiferent de frecvența sa.